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技術(shù)文章 / article
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直接法是細胞因子ELISA試劑盒的一種檢驗方法

2019-05-10 瀏覽次數(shù):1592

     細胞因子是免疫原、絲裂原或其他刺激劑誘導(dǎo)多種細胞產(chǎn)生的低分子量可溶性蛋白質(zhì),具有調(diào)節(jié)固有免疫和適應(yīng)性免疫、血細胞生成、細胞生長以及損傷組織修復(fù)等多種功能。細胞因子可被分為白細胞介素、干擾素、腫瘤壞死因子超家族、集落刺激因子、趨化因子、生長因子等。眾多細胞因子在體內(nèi)通過旁分泌、自分泌或內(nèi)分泌等方式發(fā)揮作用,具有多效性、重疊性、拮抗性、協(xié)同性等多種生理特性,形成了十分復(fù)雜的細胞因子調(diào)節(jié)網(wǎng)絡(luò),參與人體多種重要的生理功能。
    細胞因子ELISA試劑盒適用于體外定性檢測人血清或血漿中的抗人類戊型肝炎(HEV)病毒 IgM 抗體ELISA檢測。一般有五種檢驗方法:間接法、捕獲法、競爭法、直接法和夾心法,本文選擇直接法重點講一下。
    直接法是用樣本中的游離抗體/抗原與固相的酶標抗體/抗原競爭性結(jié)合的分析方法。當游離抗體(或抗原)濃度越高,則能與固定抗原(或抗體)結(jié)合的酶標抗體(或抗原)就越少,后續(xù)顯色就越淺,即與對照相比,顯色越淺,表示檢測樣本中抗體(或抗原)含量越高。該法特別適合小分子物質(zhì)的檢測也可用于檢測比較不純的樣本,且重復(fù)性好,但是檢測的靈敏度和專一性較差。競爭法測抗原常用于檢測小分子抗原及半抗原,這類抗原通常缺乏兩個以上的識別位點,不適用于雙抗夾心法進行測定。該方法在商業(yè)化ELISA試劑盒中被廣泛運用。競爭法測抗體常常用于檢測某些干擾物質(zhì)不易去除的樣本及難以純化得到抗原等情況。下圖以固相酶標抗原為例,固相酶標抗體類似

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