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直接法是細(xì)胞因子ELISA試劑盒的一種檢驗(yàn)方法

2019-05-10 瀏覽次數(shù):1625

     細(xì)胞因子是免疫原、絲裂原或其他刺激劑誘導(dǎo)多種細(xì)胞產(chǎn)生的低分子量可溶性蛋白質(zhì),具有調(diào)節(jié)固有免疫和適應(yīng)性免疫、血細(xì)胞生成、細(xì)胞生長(zhǎng)以及損傷組織修復(fù)等多種功能。細(xì)胞因子可被分為白細(xì)胞介素、干擾素、腫瘤壞死因子超家族、集落刺激因子、趨化因子、生長(zhǎng)因子等。眾多細(xì)胞因子在體內(nèi)通過(guò)旁分泌、自分泌或內(nèi)分泌等方式發(fā)揮作用,具有多效性、重疊性、拮抗性、協(xié)同性等多種生理特性,形成了十分復(fù)雜的細(xì)胞因子調(diào)節(jié)網(wǎng)絡(luò),參與人體多種重要的生理功能。
    細(xì)胞因子ELISA試劑盒適用于體外定性檢測(cè)人血清或血漿中的抗人類戊型肝炎(HEV)病毒 IgM 抗體ELISA檢測(cè)。一般有五種檢驗(yàn)方法:間接法、捕獲法、競(jìng)爭(zhēng)法、直接法和夾心法,本文選擇直接法重點(diǎn)講一下。
    直接法是用樣本中的游離抗體/抗原與固相的酶標(biāo)抗體/抗原競(jìng)爭(zhēng)性結(jié)合的分析方法。當(dāng)游離抗體(或抗原)濃度越高,則能與固定抗原(或抗體)結(jié)合的酶標(biāo)抗體(或抗原)就越少,后續(xù)顯色就越淺,即與對(duì)照相比,顯色越淺,表示檢測(cè)樣本中抗體(或抗原)含量越高。該法特別適合小分子物質(zhì)的檢測(cè)也可用于檢測(cè)比較不純的樣本,且重復(fù)性好,但是檢測(cè)的靈敏度和專一性較差。競(jìng)爭(zhēng)法測(cè)抗原常用于檢測(cè)小分子抗原及半抗原,這類抗原通常缺乏兩個(gè)以上的識(shí)別位點(diǎn),不適用于雙抗夾心法進(jìn)行測(cè)定。該方法在商業(yè)化ELISA試劑盒中被廣泛運(yùn)用。競(jìng)爭(zhēng)法測(cè)抗體常常用于檢測(cè)某些干擾物質(zhì)不易去除的樣本及難以純化得到抗原等情況。下圖以固相酶標(biāo)抗原為例,固相酶標(biāo)抗體類似

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