技術文章 / article
生長因子試劑盒注意事項和ELISA技術指南
2016-09-26 瀏覽次數(shù)：2404
生長因子試劑盒實驗室注意事項：
1、試劑不能與手接觸。
2、要用潔凈的藥勺，量筒或滴管取用試劑，不準用同一種工具同時連續(xù)取用多種試劑。取完一種試劑后，應將工具洗凈、擦干后，方可取用另一種試劑。
3、試劑取用后一定要將瓶塞蓋緊，不可放錯瓶蓋和滴管，絕不允許張冠李戴，用完后將瓶放回原處。
4、已取出的試劑不能再放回原試劑瓶內(nèi)。
常見的ELISA常見技術指南：
1、選擇抗體時選擇一個單抗和一個多抗進行配對；若選擇兩個單抗，必須識別不同表位的抗體；從同一家公司選擇抗體對。
2、ELISA實驗中為了確定*信號和zui低背景應將捕獲抗體（0.5-4μg/ml）和檢測抗體（0.25-2μg/ml）在預實驗中進行彼此相抗的滴定。同時，應包括在適當范圍內(nèi)的標準品的系列稀釋。按試劑說明書常規(guī)提供的范圍進行操作。
3、標準品的配制：對于每種細胞因子應仔細閱讀說明書，注意每批的細節(jié)。在使用細胞因子前，瞬時離心試劑瓶，盡可能多地收回其中的細胞因子。根據(jù)每批說明書中的細節(jié)，將凍干的細胞因子復溶。
4、一般待測抗原標準曲線的線性范圍的可通過將標準品做8次2倍系列稀釋從2000pg/ml 到15pg/ml。可利用標準的ELISA操作流程、放大試劑盒、第三類試劑、或改變酶底物系統(tǒng)可在一定范圍內(nèi)提高靈敏度。
5、為了優(yōu)化靈敏度，建議過夜孵育標準品和標本。
6、若使用過氧化物酶作為顯色系統(tǒng)，應嚴禁在洗液和稀釋液中加疊氮鈉，疊氮鈉可抑制過氧化物酶的活性。
7、當測定混合液體中的抗原時，如血清大鼠同型半胱氨酸，建議在標本稀釋液中加不相干的Ig。
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